沙門(mén)氏菌檢測(cè)（全文完整）

一、檢測(cè)方法

檢測(cè)步驟
1. 前增菌和增菌。凍肉、蛋品、乳品及其他加工食品均應(yīng)經(jīng)過(guò)前增菌，各稱取檢樣25g，加在裝有225mL緩沖蛋白胨水的500mL廣口瓶?jī)?nèi)。固體食品可先應(yīng)用均質(zhì)器，以8000~10000r/min打碎1min，或用乳缽加滅菌砂磨碎；粉狀食品用滅菌匙或玻棒研磨使乳化，于36±1℃培養(yǎng)4h（干蛋品需培養(yǎng)18~24h），移取10mL，轉(zhuǎn)種于100mL氯化鎂孔雀綠增菌液或四硫磺酸鈉煌綠增菌液內(nèi)，于42℃培養(yǎng)18~24h。同時(shí)另取10mL，加入于100mL亞硒酸鹽胱氨酸增菌液內(nèi)，于36±1℃培養(yǎng)18~24h。
鮮肉、鮮蛋、鮮乳或其他未經(jīng)加工的食品不必經(jīng)過(guò)前增菌。各取25g（25mL），加入滅菌生理鹽水25mL，按前法做成檢樣勻液，取其半量接種于100mL氯化鎂孔雀綠增菌液或四硫磺酸鈉煌綠增菌液內(nèi)，于42℃培養(yǎng)24h；另半量接種于100mL亞硒酸鹽胱氨酸增菌液內(nèi)，于36±1℃培養(yǎng)18~24h。
2. 分離。取增菌液1環(huán)，劃線接種于亞硫酸鉍瓊脂平板和DHL瓊脂平板（或HE、WS、SS瓊脂平板）各一個(gè)。于36±1℃分別培養(yǎng)18~24h（DHL、HE、WS、SS）或40~48h（BS）。觀察各個(gè)平板上生長(zhǎng)的菌落。其菌落特征見(jiàn)表3-1。
挑取選擇性瓊脂平板上的可疑菌落，接種三糖鐵瓊脂斜面，一般應(yīng)多挑幾個(gè)菌落，以防遺漏，沙門(mén)氏菌在三糖鐵瓊脂上與腸桿菌科各屬可疑反應(yīng)的鑒別見(jiàn)表3~2。
3. 生化學(xué)鑒定。在接種三糖鐵瓊脂的同時(shí)，再接種蛋白胨水（供靛基質(zhì)試驗(yàn)用），尿素瓊脂（pH7.2）、氰化鉀（KCN）培養(yǎng)基和賴氨酸脫羧酶試驗(yàn)培養(yǎng)基及對(duì)照培養(yǎng)基各一管，于36±1℃培養(yǎng)18~24h，必要時(shí)可延長(zhǎng)至48h，按表3判定結(jié)果，如遇有非典型菌株，可根據(jù)情況補(bǔ)做有關(guān)生物化學(xué)試驗(yàn)，必要時(shí)進(jìn)行各亞屬的鑒定。
4. 血清學(xué)分型。一般采用1.5％瓊脂斜面培養(yǎng)物做玻片凝集試驗(yàn)。
（1）O抗原的鑒定：首選用A~F多價(jià)血清做玻片凝集試驗(yàn)，同時(shí)用生理鹽水作對(duì)照，生理鹽水自凝者不能分型。凡A~F多價(jià)血清呈現(xiàn)凝集者，可依次用Ｏ因子血清進(jìn)行凝集試驗(yàn)，根據(jù)結(jié)果判定Ｏ群。如不被A~F多價(jià)Ｏ血清凝集者，可用57種或163種沙門(mén)氏菌因子血清中的7種多價(jià)血清檢查，如有其中一種血清凝集，則用這種血清包括的Ｏ群血清逐一檢查，以確定Ｏ群。如果由于Vi抗原存在而阻止Ｏ凝集時(shí)，可將菌苔用生理鹽水作成濃菌液煮沸后再檢查。
（2）H抗原的鑒定。根據(jù)所確定的Ｏ群，依次用H因子血清檢查1相和2相的H抗原，對(duì)不常見(jiàn)的菌型，可先用多價(jià)H血清檢查，如其中某種多價(jià)血清凝集時(shí)，則再用此血清所包括的H因子血清逐一檢查，以確定第1相和第2相的H抗原，如無(wú)單因子血清時(shí)，要用兩個(gè)H復(fù)合因子血清核對(duì)其檢查的結(jié)果。如僅檢出第1相或第2相時(shí)，可在瓊脂斜面上移種1~2代后再檢查，若仍為一相，要用位相變異的方法檢查其另一相H抗原。
常用的位相變異試驗(yàn)方法如下：
小套管法：將兩端開(kāi)口的小玻管（下端開(kāi)口要留一缺口，不要平齊）放在半固體管內(nèi)，小玻管的上端應(yīng)高出培養(yǎng)基的表面，滅菌備用。溶化瓊脂冷至50℃時(shí)，挑取已知H因子血清1環(huán)，加入套管中的瓊脂表面，于37℃培養(yǎng)，每日觀察，另一相解離后可由套管外的半固體表面取菌檢查。
U型管法：向0.4％瓊脂培養(yǎng)基中加入適量血清，裝入滅菌U形管內(nèi)，管口塞棉塞，凝固后由一端接種細(xì)菌，經(jīng)培養(yǎng)再由另一端取菌檢查。
簡(jiǎn)易平板法：將0.7％~0.8％半固體瓊脂平板烘干表面水分，挑取因子血清1環(huán)，滴在半固體平板表面，放置片刻，待血清吸收到瓊脂內(nèi)，在血清部位的中央點(diǎn)種待檢細(xì)菌，培養(yǎng)后，在形成蔓延生長(zhǎng)的菌苔邊緣取菌檢查。
（3）Vi抗原的鑒定：用Vi因子血清檢查。已知具有Vi抗原的菌型有傷寒沙門(mén)氏菌，丙型副傷寒沙門(mén)氏菌，都柏林沙門(mén)氏菌。
5. 菌型的判定和結(jié)果報(bào)告。綜合以上生化試驗(yàn)和血清學(xué)分型鑒別的結(jié)果，按照沙門(mén)氏菌屬抗原表判定菌型，并報(bào)告結(jié)果。

（二）生化性狀

注：本表系根據(jù)國(guó)內(nèi)國(guó)外常見(jiàn)沙門(mén)氏菌整理而成。

三、培養(yǎng)基

（一）緩沖蛋白胨水
成分：蛋白胨　　　　　　　　　　　　　10g
氯化鈉　　　　　　　　　　　　　5g
磷酸氫二鈉（Na2HPO4·12H2O）　?9g
磷酸二氫鉀　　　　　　　　　　　1.5g
蒸餾水　　　　　　　　　　　　　1000mL
pH7.2
按上述成分配好后，裝入大燒瓶，121℃高壓滅菌，臨用時(shí)無(wú)菌分裝每瓶225mL，供沙門(mén)氏菌前增菌用。
（二）氯化鎂孔雀綠（MM）增菌液
成分：甲液：胰蛋白胨　　　　　　　　　5g
氯化鈉　　　　　　　　　　8g
磷酸二氫鉀　　　　　　　　1.6g
蒸餾水　　　　　　　　　　1000mL
乙液：氯化鎂（化學(xué)純）　　　　　　40g
蒸餾水　　　　　　　　　　100mL
丙液：0.4％孔雀綠水溶液
制法：分別按上述成分配好，121℃高壓滅菌15min備用，臨用時(shí)取甲液90mL，乙液9mL，丙液0.9mL，以無(wú)菌操作混合即可。
（三）四硫磺酸鈉煌綠（TTB）增菌液
成分：多胨或月示胨　　　　　　　　?5g
膽鹽　　　　　　　　　　　　　　1g
碳酸鈣　　　　　　　　　　　　　10g
硫代硫酸鈉　　　　　　　　　　　30g
蒸餾水　　　　　　　　　　　　　1 000mL
制法：將上述各成分加入蒸餾水，加熱溶解，分裝每瓶100mL中加入碘溶液2mL，0.1％煌綠溶液1mL。
碘溶液配制：碘6g，碘化鉀5g，蒸餾水20mL。
（四）亞硒酸鹽胱氨酸（SC）增菌液
成分：蛋白胨　　　　　　　　　　　5g
乳糖　　　　　　　　　　　　4g
亞硒酸氫鈉 　　　　　　　　?4g
磷酸氫二鈉　　　　　　　　　5.5g
磷酸二氫鉀　　　　　　　　?4.5g
L－胱氨酸　　　　　　　　　?0.01g
蒸餾水　　　　　　　　　　　1 000mL
制法：將除亞硒酸氫鈉和L－胱氨酸以外的各成分溶解于900mL蒸餾水中，加熱煮沸，俟冷備用，另將亞硒酸氫鈉溶解于100mL蒸餾水中，加熱煮沸，俟冷，以無(wú)菌操作與上液混合。再加入1％L~胱氨酸~氫氧化鈉溶液1mL。分裝于滅菌瓶中，每瓶100mL，pH應(yīng)為7.0±0.1。
1％L-胱氨酸-氫氧化鈉溶液的配法：稱取L-胱氨酸0.1g（或DL-胱氨酸0.2g），加1N氫氧化鈉1.5mL，使溶解，再加入蒸餾水8.5mL即成。
（五）亞硫酸鉍瓊脂（BS）
成分：蛋白胨　　　　　　　　10g
牛肉膏　　　　　　　　5g
葡萄糖　　　　　　　　5g
硫酸亞鐵　　　　　　　0.3g
磷酸氫二鈉　　　　　　4g
煌綠　　　　　　　　　0.025g
檸檬酸鉍銨　　　　　　2g
亞硫酸鈉　　　　　　?6g
瓊脂?18~20g
蒸餾水　　　　　　　　1000mL
pH7.5
制法：將前5種成分溶解于300mL蒸餾水中，將檸檬酸鉍銨和亞硫酸鈉另用50mL蒸餾水溶解，將瓊脂于600mL蒸餾水中煮沸溶解，冷至80℃，將以上三液合并，補(bǔ)充蒸餾水至1000mL，校正pH，加0.5％煌綠水溶液5mL搖勻，冷至50~55℃傾注平板。
注：此培養(yǎng)基不需高壓滅菌，制備過(guò)程中不宜過(guò)分加熱，以免降低其選擇性，應(yīng)在臨用前一天制備，貯存于室溫暗處，超過(guò)48h，不宜使用。
（六）DHL瓊脂（Deoxycholate Hydrogen Sulfide Lactose Agar）
成分：蛋白胨　　　　　　　　　　　20g
牛肉膏　　　　　　　　　　　3g
乳糖　　　　　　　　　　　　10g
蔗糖　　　　　　　　　　　　10g
去氧膽酸鈉　　　　　　　　　1g
硫代硫酸鈉　　　　　　　　　2.3g
檸檬酸鈉　　　　　　　　　?1g
檸檬酸鐵銨　　　　　　　　　1g
中性紅　　　　　　　　　　　0.03g
瓊脂　　　　　　　　　　　　18~20g
蒸餾水　　　　　　　　　　　1000mL
制法：除中性紅和瓊脂以外的成分溶解于400mL蒸餾水中，校正pH為7.3，再將瓊脂于600mL蒸餾水中煮沸溶解，兩液合并，加入0.5％中性紅水溶液6mL，待冷至50~55℃傾注平板。
（七）HE瓊脂（Hektoen Enteric Agar）
成分：月示胨　　　　　　　　　　　?12g
牛肉膏　　　　　　　　　　　　?3g
乳糖　　　　　　　　　　　　　?12g
蔗糖　　　　　　　　　　　　?12g
水楊素?2g
膽鹽?20g
氯化鈉?5g
瓊脂　　　　　　　　　　　　　?18~20g
蒸餾水　　　　　　　　　　　　?1000mL
0.4％溴麝香草酚藍(lán)溶液　　　　?16mL
Andrade指示劑　　　　　　　　?20mL
甲液　　　　　　　　　　　　　?20mL
乙液　　　　　　　　　　　　　?20mL
pH7.5
制法：將前7種成分溶解于400mL蒸餾水內(nèi)為基礎(chǔ)液，將瓊脂加入于60mL蒸餾水內(nèi)，加熱溶解，加入甲液和乙液于基礎(chǔ)液內(nèi)，校正pH，再加入指示劑，并與瓊脂合并，待冷至50~55℃傾注平板。
注：①此培養(yǎng)基不可高壓滅菌。
②甲液的配制：
硫代硫酸鈉　　　　　34g
檸檬酸鐵銨　　　　　4g
蒸餾水　　　　　　　100mL
③乙液的配制：
去氧膽酸鈉　　　　　10g
蒸餾水　　　　　　　100mL
④Andrade指示劑：
酸性復(fù)紅　　　　　　?0.5g
1N氫氧化鈉溶液　　?16mL
蒸餾水　　　　　　?100mL
將復(fù)紅溶解于蒸餾水中，加入氫氧化鈉溶液，數(shù)小時(shí)后中復(fù)紅褪色不全，再加氫氧化鈉溶液1~2mL。
（八）SS瓊脂
1.?基礎(chǔ)培養(yǎng)基
成分：牛肉膏　　　　　　　　　5g
月示胨　　　　　　　?5g
三號(hào)膽鹽　　　　　　　　3.5g
瓊脂　　　　　　　　　　17g
蒸餾水　　　　　　　　　1000mL
制法：將牛肉膏、月示 胨和膽鹽溶解于400mL蒸餾水中，將瓊脂加入于600mL蒸餾水中，煮沸，使其溶解，再將兩液混合，121℃高壓滅菌15min，保存?zhèn)溆谩?br /> 2.?完全培養(yǎng)基
成分：基礎(chǔ)培養(yǎng)基　　　　　　　1000mL
乳糖　　　　　　　　　　10g
檸檬酸鈉　　　　　　　　8.5g
硫代硫酸鈉　　　　　　　8.5g
10％檸檬酸鐵溶液　　　　10mL
1％中性紅溶液　　　　　?2.5mL
0.1％煌綠溶液　　　　　?0.33mL
制法：加熱溶化基礎(chǔ)培養(yǎng)基，按比例加入上述染料以外的各成分，充分混合均勻，校正pH至7.0，加入中性紅和煌綠溶液，傾注平板。
注：①?制好的培養(yǎng)基宜當(dāng)日使用，或保存冰箱內(nèi)于48h內(nèi)使用。
②?煌綠溶液配好后應(yīng)在10d以內(nèi)使用。
③?可以購(gòu)用SS瓊脂的干燥培養(yǎng)基。
（九）三糖鐵瓊脂
成分：蛋白胨：　　　　　　　　?20g
牛肉膏　　　　　　　　　?5g
乳糖　　　　　　　　　　?10g
蔗糖　　　　　　　　　　?10g
葡萄糖　　　　　　　　　?1g
氯化鈉　　　　　　　　　?5g
硫酸亞鐵銨[Fe（NH4）2（SO4）2·6H2O]0.2g
硫代硫酸鈉　　　　　　　　　　　0.2g
瓊脂　　　　　　　　　　　　　　12g
酚紅　　　　　　　　　　　　　　0.025g
蒸餾水　　　　　　　　　　　　　1000mL
pH7.4
制法：將除瓊脂和酚紅以外的各成分溶解于蒸餾水中，校正pH，加入瓊脂煮沸溶化，加入0.2％酚紅水溶液12.5mL，搖勻，分裝試管，121℃高壓滅菌15min，放置高層斜面?zhèn)溆谩?br /> （十）蛋白胨水（靛基質(zhì)試驗(yàn)用）
萬(wàn)分：蛋白胨（或胰蛋白胨）　　　　　　20g
氯化鈉　　　　　　　　　　　　　5g
蒸餾水　　　　　　　　　　　　　1000mL
pH7.4
制法：按上述成分配制，分裝小試管，121℃高壓滅菌15min。
靛基質(zhì)試劑：
柯凡克試劑：將5g對(duì)二甲氨基苯甲醛溶于75mL戊醇中，然后緩慢加入濃鹽酸25mL。
歐-波試劑：將1g對(duì)二甲氨基苯甲醛溶解于95mL95％酒精內(nèi)，然后緩慢加入濃鹽酸20mL。
試驗(yàn)方法：接種培養(yǎng)物36±1℃培養(yǎng)1~2d，加柯凡克試劑約0.5mL，輕搖試管，陽(yáng)性者于試劑層呈深紅色。或加歐-波試劑約0.5mL，沿管壁下覆蓋于培養(yǎng)基表面，陽(yáng)性者于液面接觸處呈玫瑰紅色。
注：蛋白胨中應(yīng)含有豐富的色氨酸，每批蛋白胨應(yīng)先用已知菌種鑒定后方可使用。
（十一）尿素瓊脂（pH7.2）
成分：蛋白胨　　　　　　　　1g
氯化鈉　　　　　　　　5g
葡萄糖　　　　　　　　1g
磷酸二氫鉀　　　　　　2g
0.4％酚紅溶液　　　　?3mL
瓊脂　　　　　　　　　20g
蒸餾水　　　　　　　　1000mL
20％尿素溶液　　　　　100mL
pH7.2
制法：將除尿素和瓊脂以外的成分配好，校正pH，加入瓊脂煮沸溶化，分裝燒瓶，121℃高壓滅菌15min，冷至50~55℃加入經(jīng)除菌過(guò)濾的尿素溶液，分裝于滅菌試管內(nèi)，放成斜面?zhèn)溆谩?br /> 試驗(yàn)方法：接種培養(yǎng)物36±1℃培養(yǎng)24h，觀察結(jié)果，尿素酶陽(yáng)性者，由于產(chǎn)堿而使培養(yǎng)基變?yōu)榧t色。
（十二）氰化鉀（KCN）培養(yǎng)基
成分：蛋白胨　　　　　　　　?10g
氯化鈉　　　　　　　　?5g
磷酸二氫鉀　　　　　　?0.225g
磷酸氫二鈉?5.64g
蒸餾水　　　　　　　　?1000mL
0.5％氰化鉀溶液　　　?20mL
pH7.6
制法：將除氰化鉀以外的成分配好，分裝燒瓶，121℃高壓滅菌15min，放在冰箱內(nèi)使用其充分冷卻，每100mL培養(yǎng)基加入0.5％氰化鉀溶液2mL（最后濃度為1:10000），分裝滅菌試管，每管約4mL，立刻用滅菌橡皮塞塞緊，放4℃冰箱保存，同時(shí)將不加氰化鉀的培養(yǎng)基作為對(duì)照培養(yǎng)基，分裝試管備用。
（十三）氨基酸脫羧酶試驗(yàn)培養(yǎng)基
成分：蛋白胨　　　　　　　　　　　5g
酵母浸膏　　　　　　　　　　3g
葡萄糖?1g
蒸餾水　　　　　　　　　　　1000mL
1.6％溴甲酚紫乙醇溶液　　　?1mL
L-氨基酸或DL氨基酸　　　　?0.5或1g/100mL
制法：除氨基酸以外的成分加熱溶解后，分裝每瓶100mL，分別加入各種氨基酸：賴氨酸、精氨酸和鳥(niǎo)氨酸。L-氨基酸按0.5％加入，DL-氨基酸按1％加入，校正pH至6.8，對(duì)照培養(yǎng)基不加氨基酸，分裝于滅菌的小試管內(nèi)，每管0.5mL，上面加一層液體石蠟，115℃高壓滅菌10min。
試驗(yàn)方法：接種培養(yǎng)物于36±1℃培養(yǎng)18~24h，觀察結(jié)果，氨基酸脫羧酶陽(yáng)性者，由于產(chǎn)堿培養(yǎng)基應(yīng)呈綠色，陰性者無(wú)堿性產(chǎn)物，但因葡萄糖產(chǎn)酸而使培養(yǎng)基變?yōu)辄S色，對(duì)照管應(yīng)為黃色。
（十四）糖發(fā)酵管
成分：牛肉膏　　　　　　　　　　5g
蛋白胨　　　　　　　　　　10g
氯化鈉　　　　　　　 　　3g
磷酸氫二鈉　　　　　　　　2g
0.2％溴麝香草酚藍(lán)溶液　　?12mL
蒸餾水　　　　　　　　　　1000mL
pH7.4
制法：葡萄糖發(fā)酵管按上述成分配好后，按0.5％加入葡萄糖，分裝于有倒管的試管內(nèi)，121℃高壓滅菌15min。其他各種糖發(fā)酵管，可按上述成分配好后分裝好后分裝每瓶100mL，121℃高壓滅菌15min，另將各種糖類分別配成10％溶液，同時(shí)高壓滅菌，將5mL糖溶液加入于100mL培養(yǎng)基內(nèi)，以無(wú)菌操作分裝小試管。
注：蔗糖不純，加熱后會(huì)自行水解者，應(yīng)采用過(guò)濾法除菌。
（十五）ONPG培養(yǎng)基
成分：鄰硝基酚β-D半乳糖苷（O~nitrophenyl
β-D-galactopyranoside ONPG）　　　?60mg
0.01mol/L磷酸鈉緩沖液（pH7.5）　　　10mL
1％蛋白胨水（pH7.5）　　　　　　　　30mL
制法：將ONPG溶于緩沖液內(nèi)，加入蛋白胨水，以過(guò)濾法除菌，分裝試管，每管0.5mL，用橡皮塞塞緊。
試驗(yàn)方法：由瓊脂斜面上挑取培養(yǎng)物1滿環(huán)接種，于36±1℃培養(yǎng)1-3h或24h觀察結(jié)果，如果β-半乳糖苷酶產(chǎn)生，由于1-3h變黃色，如無(wú)此酶則24h不變色。
（十六）半固體瓊脂
成分：蛋白胨　　　　　　　　　　1g
牛肉膏　　　　　　　　　　0.3g
氯化鈉　　　　　　　　　?0.5g
瓊脂　　　　　　　　　　　0.35~0.4g
蒸餾水　　　　　　　　　　100mL
制法：按上述成分配好，煮沸溶解，校pH為7.4，分裝小試管，121℃高壓滅菌15min，直立疑固備用。
（十七）緩沖葡萄糖蛋白胨水（MR和V-P試驗(yàn)用）
成分：磷酸氫二鉀　　　　　　　　5g
多胨　　　　　　　　　　?7g
葡萄糖　　　　　　　　　　5g
蒸餾水　　　　　　　　　　1000mL
pH7.0
制法：溶化后校正pH，分裝試管，每管1~2mL，121℃高壓滅菌15min。
甲基紅試驗(yàn)：接種培養(yǎng)物于36±1℃培養(yǎng)2~4天，滴加試劑一滴，立即觀察結(jié)果，鮮紅色為陽(yáng)性，黃色為陰性。
甲基紅試劑配法：10mg甲基紅溶于30mL乙醇中，然后加入20mL蒸餾水。
V-P試驗(yàn)：接種培養(yǎng)物于36±1℃培養(yǎng)2~4天，加入6％α-萘酚酒精溶液0.5mL和40％氫氧化鉀溶液0.2mL，充分振搖觀察結(jié)果，陽(yáng)性者立刻或數(shù)分鐘呈紅色，如陰性時(shí)應(yīng)于36℃培養(yǎng)4h再進(jìn)行觀察。
（十八）丙二酸鈉培養(yǎng)基
成分：酵母膏　　　　　　　　　　1g
硫酸銨　　　　　　　　　?2g
磷酸氫二鉀　　　　　　　　0.6g
磷酸二氫鉀　　　　　　　　0.4g
氯化鈉　　　　　　　　　　2g
丙二酸鈉　　　　　　　　　3g
0.2％溴麝香草酚藍(lán)溶液　　?12mL
蒸餾水　　　　　　　　　　1000mL
pH6.8
制法：先將酵母浸膏和鹽類溶解于水，校正pH后再加指示劑，分裝試管，121℃高壓滅菌15min。
接種培養(yǎng)物于36±1℃培養(yǎng)48h，陽(yáng)性者由綠色變?yōu)樗{(lán)色。
（十九）氧化酶試驗(yàn)
1％鹽酸二甲基對(duì)苯二胺溶液：小量新鮮配制，于冰箱內(nèi)避光保存。
1％α-萘酚乙醇溶液。
試驗(yàn)方法：取白色潔凈濾紙沾取菌落，加鹽酸二甲基對(duì)苯二胺溶液一滴，陽(yáng)性者呈現(xiàn)粉紅色，并逐漸加深，再加α-萘酚溶液一滴，陽(yáng)性者于半分鐘內(nèi)呈現(xiàn)鮮藍(lán)色，陰性于2min內(nèi)不變。
以毛細(xì)吸管吸取試劑，直接滴加于菌落上，其顯色反應(yīng)與以上相同。
（二十）WS瓊脂
成分：
月示胨　　　　　　　　　　　?12g
牛肉膏　　　　　　　　　　　　　　3g
氯化鈉　　　　　　　　　　　　　　5g
乳糖　　　　　　　　　　　　　　　12g
蔗糖　　　　　　　　　　　　　　?12g
十二烷基硫酸鈉　　　　　　　　　　2g
瓊脂　　　　　　　　　　　　　　　15g
Andrade指示劑　　　　　　　　　　?20mL
0.4％溴麝香草酚藍(lán)溶液?16mL
甲液　　　　　　　　　　　　　　?20mL
蒸餾水　　　　　　　　　　　　　　1000mL
pH7.0
制法：
除指示劑和甲液外，將其他成分加熱溶解，不需消毒，校正pH后加入指示劑和甲液，傾注平板，應(yīng)呈草綠色。
注：①供沙門(mén)氏菌分離用。
②Andrade指示劑和甲液的配制均見(jiàn)HE瓊脂。